ابو عبدالعزيز
مدير عام الموقع
 عدد الرسائل : 561
العمر : 47
تاريخ التسجيل : 29/10/2007
 | موضوع: طريقة عمل منحنى قياسى لقراءة إنزيمات الكبد  الأربعاء 24 ديسمبر - 9:44 | |
| Standard Curve طريقة عمل منحنى قياسى لقراءة إنزيمات الكبد ( S.G.O.T) (S.G.P.T.)نقوم بتنفيذ الجدل التالى فى عدد 6 أنابيب إختبار مرقمة لكل انزيم على حدى بمعنى أننا نحتاج الى 12 أنبوبة إختبار لنتمكن من عمل المنحنى للإنزيمين معا ويجب عليك أن تكون قد قمت بتحضير محلول هيدروكسيد الصوديوم 0.4 عيارى فى المعمل (16 جم /لتر ماء مقطر) Pipette into test tubes ml | 6 | 5 | 4 | 3 | 2 | 1 | .Tube no | 0.2
0.5
0.5
1 | 0.2
0.6
0.4
1 | 0.2
0.7
0.3
1 | 0.2
0.8
0.2
1 | 0.2
0.9
0.1
1 | 0.2
1
--
1 | Distilled water
R1 or R2
R4
R3
| | Mix.Let stand for 20 min. at room temperature. | | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | NaOH0.4N | | Mix Wait 5 min.measure |
الطريقة :- نقوم بتنفيذ الجدول المقابل بالترتيب وبصورة دقيقة مع ملا حظة أن وحدة القياس هى المليلتر , كما أنه نحتاج الى ماصة أتوماتك متغيرة الحجم تلبى الأحجام المطلوبة لتنفيذ الخطوات المقابلة فى الجدول,المحاليل المستخدمة :-1- R1 وهو Got substrate 2- R2 وهو Gpt substrate 3- R3 وهو color reagent 4- R3 وهو standard بعد الانتهاء من الخطوات السابقة فى الجدول المقابل يكون عندنا عدد 12 أنبوبة , ستة للانزيم الأول وستة للانزيم الثانى معدة وجاهزة للقراءة على جهاز قياس الالوان بالمعمل عند طول موجى 505 nm , وضبط صفر الجهاز على الماء المقطر.رسم المنحنى :- الجدول التالى وردت به بعض التركيزات من قبل الشركة المصممة للكيت , وبالربط بين هذه التركيزات والقراءة لكل انبوبة بالترتيب يمكن تحديد أو رسم نقطة محددة على ورقة الرسم البيانى حتى نصل الى الشكل النهائى لنحنى كل انزيم على حدى .| -- | 126 | 83 | 50 | 25 | 0 | Gpt units/ml | | | | | | | | قراءة الانابيب على الجهاز |
| 215 | 150 | 95 | 55 | 22 | 0 | Got units/ml | | | | | | | | قراءة الانابيب على الجهاز |
بعد قراءة الأنابيب بالكامل ووضع كل قراءة أمبوبة تحت تركيزها بنفس الترتيب لكل أنبوبة من واحد الى ستة نقوم بتنفيذ كل من الجداول السابقة على ورق الرسم البيانى وتحديد النقط بالعلاقة بين المحور الرأسى( الخاص بالقراءة) والمحور الأفقى (الخاص بالتركيز) ثم نقوم بتوصيل النقاط المحددة وعددها 6 على ورقة الرسم البيانى لرسم المنحنى القياسر لكل انزيم ويكون جاهز للاستخدام بعد ذلك . | |
|
